土壤有機物是指存在于土壤中的所含碳的有機物質，它包括各種動植物的殘體、微生物體及其會分解和合成的各種有機質，是土壤固相部分的重要組成成分，其含量水平是衡量土壤肥力的重要指標之一，對土壤形成、土壤肥力、環境保護及農林業可持續發展等方面都有著重要作用的意義。

 

　　今天要為大家介紹的是土壤有機物檢測試劑盒的兩種檢測模式：

 

　　雙雜交探針模式：FRET探針又稱雙雜交探針，FRET探針由兩條相鄰探針組成，在一條探針端標記FAM熒光基團，另一探針端標記Red640熒光基團。當復性時，探針結合在模板上，FAM基團和Red640基團相鄰，激發FAM產生的熒光，作為Red640基團的激發光被吸收，使Red640發出波長為640的熒光。當變性時，探針游離，兩基團距離遠，不能產生640波長的熒光。由于FRET探針是靠近發光，所以檢測信號是實時信號，非累積信號。

 

　　交探針模式：分子信標是一種呈發夾結構的莖環寡核苷酸探針，兩端的核酸序列互補配對，因此標記在一端的熒光基團與標記在另一端的淬滅基團緊緊靠近。熒光基團被激發后產生的光子被淬滅劑淬滅，由熒光基團產生的能量以紅外而不是可見光形式釋放出來。分子信標的莖環結構中，環一般為15-30個核苷酸長，并與目標序列互補；莖一般5-7個核苷酸長，并相互配對形成莖的結構。熒光基團標記在探針的一端，而淬滅劑則標記在另一端。在復性溫度下，因為模板不存在時形成莖環結構，當加熱變性會互補配對的莖環雙鏈解開，如果有模板存在環序列將與模板配對。與模板配對后，分子信標將成鏈狀而非發夾狀，使得熒光基團與淬滅劑分開。當熒光基團被激發時，因淬滅作用被解除，發出激發光子。由于是酶切作用的存在，分子信標也是積累熒光。