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SRB檢測試劑盒在操作性上更顯便利

更新時間:2019-01-15點擊次數:1206
   SRB又稱硫酸鹽還原菌,是一種厭氧的微生物,廣泛存在于土壤、海水、河水、地下管道以及油氣井等缺氧環境中,據統計,目前,硫酸鹽還原菌已有12個屬40多個種, 從生理學上分為兩大類,分別是:
  1、Ⅰ類:如脫硫弧菌屬、脫硫單胞菌屬、脫硫葉菌屬和脫硫腸狀菌屬,其特點是可利用乳酸、丙酮酸、乙醇或某些脂肪酸為碳源及能源,將硫酸鹽還原為硫化氫;
  2、Ⅱ類:如脫硫菌屬、脫硫球菌屬、脫硫八疊球菌屬和脫硫線菌屬,它們的特別之處是可以氧化脂肪酸,并將硫酸鹽還原為硫。現在,隨著研究的進展,陸續又有一些新的種屬被命名。
  SRB檢測的操作步驟說明:
  1、細胞固定:藥物作用時間終點時,每孔加入50μL4℃預冷的TCA溶液(30%,w/v)固定細胞,TCA溶液的終濃度為10%。靜置5 min移入4℃冰箱中固定1h,取出用去離子水沖洗5遍,室溫晾干。
  2、染色:待96孔板室溫下晾干后,每孔加入0.4%(w/v)的SRB染液(1%的乙酸配制)70μL,染色30 min后倒掉染液,用1%(v/v)乙酸沖洗4次,去除未結合的染料,室溫晾干。
  3、檢測:用100μL非緩沖Tris-base堿液(10mM,pH=10.5)溶解與細胞蛋白結合的染料,水平搖床上振蕩20min,采用酶標儀540nm處測定光吸收值。操作中,應注意洗除染料時操作需迅速,避免用移液器吸取液體,防止動作過慢造成與細胞蛋白結合的染料解吸附。
  SRB檢測試劑盒是一種采用酶免疫方法進行快速檢測硫酸鹽還原菌(SRB)的設備,采用了高純度的抗體來探測腺苷-5’-磷酰磺酸酯酶(APS),這種還原酶是所有SRB菌株擁有的共同特征,SRB檢測試劑盒的優勢在于高純度的抗體附著在小顆粒上選擇性的捕捉APS還原酶。小顆粒和捕捉到的還原酶被隔離到多孔膜當中,在表面形成反應層,并且變藍,表征了APS還原酶的存在數量,每個試劑盒包括了全部必須的用來檢測SRB的材料。無需預處理或者稀釋待測樣品,而且沒有任何特殊的危險廢物產生。
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